Serum-vrije systemen
Celcultuur, de in vitro kweek van cellen geïsoleerd uit levend weefsel, is een erkend en waardevol hulpmiddel in biomedisch onderzoek voor de verwerving van reproduceerbare gegevens. Daarnaast worden op grote schaal zeer effectieve stoffen geproduceerd voor de geneeskunde of biofarmaceutisch en wetenschappelijk onderzoek door middel van steeds meer celculturen (bijvoorbeeld insuline, groeifactoren, monoklonale antilichamen of stollingsfactoren).
Celculturen met serum:
Voor celculturen in vitro zijn voedingsoplossingen, zogenaamde media, nodig die een simulatie van de in vivo situatie zo dicht mogelijk benaderen. Daartoe moeten deze celkweekmedia - mengsels van nutriënten, zouten, sporenelementen, buffers, groeifactoren, beschermende bindmiddelen en transportproteïnen en vele aanvullende componenten - worden aangevuld met een zeer natuurlijk, zeer complex additievenmengsel. Jarenlang waren van dieren afkomstige en ook menselijke sera de meest geschikte middelen omwille van productiegerelateerde redenen en tevens bij gebrek aan alternatieven voor meer gedefinieerde voedingsstoffen voor celkweek.
Functie van serum in celculturen
◾Groeifactoren en hormonen stimuleren celgroei, -proliferatie en -differentiatie
◾Factoren die de aanhechting van cellen aan een cultuurplaat bevorderen en mogelijk maken (biomatrix)
◾Transport en bindingsproteïnen ondersteunen de voorziening met hormonen, mineralen en lipiden.
◾Serum proteïnen binden giftige stoffen en stabiliseren gevoelige groeifactoren. Het gebruik van serum in celculturen, meestal Foetal Bovine Serum (FBS), is echter om verschillende redenen problematisch.
Nadelen van serum in celcultuur:
◾De samenstelling van het serum is variabel en hangt af van de leeftijd van de foetus, de herkomst, de voeding van de dieren en de tijd van het jaar bij het slachten.
◾Serum loten moeten voor gebruik uitgebreid worden getest op hun geschiktheid.
◾Test resultaten zijn vaak onbevredigend en vaak niet vergelijkbaar vanwege de ongedefinieerde en inconsistente aard van serum
◾Risico op besmetting met bacteriën, schimmels, mycoplasma en virussen.
◾Risico op besmetting met TSE-agentia (overdraagbare spongiforme encefalopathie).
◾Mogelijke onzuiverheden in de eindproducten als gevolg van restserumeiwitten of pyrogenen
◾Tijdsintensieve zuivering van de eindproducten uit cultuurmedia die serum bevatten
◾Onzekere beschikbaarheid en stijgende kosten van serum
De serumvrije celcultuur:
Vanwege de talrijke nadelen van een serumbevattende celcultuur worden er al vele jaren aanzienlijke onderzoeks- en ontwikkelingsinspanningen geleverd om celculturen eindelijk tot stand te brengen onder serumvrije omstandigheden.
Voordelen van een serumvrije celcultuur:
◾Lager risico op besmetting met bacteriën, schimmels, mycoplasma of virussen
◾Gedefinieerde en reproduceerbare formuleringen leiden tot meer overtuigende en vergelijkbare onderzoeksgegevens.
◾Tijdsintensieve batchtests zijn niet nodig.
◾Eliminatie van een bron van mogelijke infectieuze agentia (prionen).
◾Vergemakkelijken van de zuivering van eindproducten.
◾Voldoet aan de wettelijke vereisten voor de productie van medische producten.
◾Reductie van onzuiverheden in eindproducten door cultuurresiduen
20 Artikels